（一） 材料
DMEM細胞培養(yǎng)液：10%的DMEM細胞培養(yǎng)液，含10%胎牛血清。
培養(yǎng)溫度: 39.0°C; (**大. 40.0 °C, **小 . 38.0°C)
胰酶-EDTA消化液：0.25% (w/v) 胰酶- 0.53 mM EDTA 溶液。
（二） 方法
1. 棄掉細胞培養(yǎng)液。
2. 用胰酶-EDTA消化液沖洗細胞單層，除掉殘余的細胞培養(yǎng)液。
3. 向細胞瓶內(nèi)加入 2.0 到 3.0 ml的胰酶-EDTA消化液，在倒置顯微鏡下觀察細胞直到細胞單層分散開來（一般5-15分鐘）。
注意: 消化細胞時禁止劇烈拍打或搖晃細胞瓶，不易消化的細胞可以放到39°C助消化。 
4. 加入6.0 到8.0 ml 的DMEM 培養(yǎng)基**細胞瓶，輕輕吹吸混勻消化細胞。
5. 取出部分細胞加入到新的細胞瓶中培養(yǎng)。
6. 在 39°C培養(yǎng)。
傳代率:一般推薦 1:2 到 1:10傳代。注：1:2指一瓶傳兩瓶。
（三）保存: 10%CS的DMEM細胞培養(yǎng)液加入5% DMSO。
保存溫度: 液氮保存